4 ВВЕДЕНИЕ
Наметившаяся тенденция производства экологически чистых продуктов питания требует поиска новых типов добавок, повышающих продуктивность животных. Одной из реальных альтернатив на сегодняшний день являются пробиотики, препараты содержащие живые культуры микроорганизмов -симбионтов желудочно-кишечного тракта. Их применяют в качестве биологически активных веществ, обладающих ростостимулирующим и лечебно-профилактическим эффектом. Преимущество их в том, что они безвредны и не имеют недостатков, присущих антибиотикам и химиотерапевтическим средствам (Антипов В. А., Субботин В. М., 1980; Тараканов Б.В.,1999).
Применение пробиотиков в животноводстве затрагивает ряд важных проблем, связанных с регулированием кишечного микробиоценоза, иммунной, гормональной и ферментативной систем организма молодняка (Панин А.Н., Малик Н.И., Вершинина И.Ю., 2002).
Для профилактики здоровья молодняка необходимо поддерживать популяцию полезных бактерий в пищеварительном тракте. Поэтому важно при его выращивании создавать необходимые условия, обеспечивающие формирование собственного микробиоценоза, включая применение средств, в том числе пробиотиков, способствующих формированию микрофлоры в нужном для организма направлении (Сизова А.В., 1974; Тимошко М.А., 1990,1992; Тараканов Б.В., 2003).
На сегодняшний день существует большое количество пробиотиков, созданных на основе лактобактерий, бифидумбактерий, молочнокислых, целлюлозолитических и других бактерий (Платонов А.В., 1985). Широко применяются в животноводстве и птицеводстве такие новые пробиотики как реалак, лаком, стрептобифид, ветом-1.1., субалин, целлобактерин, лактоами-ловарин и другие (Иноземцев В.П.и др., 1997; Тараканов Б.В.и др., 1999,2002; Малик Н.И., Панин А.Н., 2001). В начале 90-х годов в ВИЖе на основе каро-тинсинтезирующей культуры Rhodococcus получен пробиотик - каротино-бактерин, эффективный в рационах цыплят-бройлеров, молодняка крупного
5 рогатого скота и свиней (Пивняк И.Г. и др., 1992,1998).
Поиск микроорганизмов, пригодных для получения новых эффективных пробиотических препаратов в настоящее время остается актуальным. Цель и задачи исследований. Целью исследований являлось изучение то-коферолсинтезирующего штамма №100 и создание на его основе нового про-биотического препарата - тококарина. Для достижения указанной цели ставились следующие задачи:
- получить сухую форму пробиотика тококарина;
- определить сохранность биомассы культуры штамма №100 и готового препарата - тококарина отдельно и в смеси с комбикормом и премиксом;
- изучить безвредность, антибиотикоустойчивость, антагонистическую активность штамма №100.
Изучить влияние тококарина на:
- интенсивность роста и профилактику заболеваний пищеварительного тракта телят;
- показатели естественной резистентности телят;
- состав микрофлоры пищеварительного тракта телят;
- содержание в крови телят витамина А, каротина и токоферола. Определить оптимальные дозы и экономическую эффективность применения препарата при выращивании телят.
Научная новизна. Впервые получен пробиотический препарат на основе то-коферолсинтезирующего штамма №100. Определены сроки его хранения в чистом виде и в смеси с комбикормом и премиксом, установлены дозы применения и изучено влияние при выращивании телят на:
- рост и развитие;
- на состояние иммунной системы;
- популяцию микроорганизмов пищеварительного тракта;
- содержание в сыворотке крови витамина А, каротина и токоферола. Практическое значение и реализация результатов исследований. Впервые разработаны лабораторный регламент получения сухой формы пробно-
6
тика тококарина на основе токоферолсинтезирующего штамма №100 и наставление по применению пробиотика тококарина при выращивании телят молочного периода.
Апробация работы и публикации. Материалы диссертации доложены и получили положительную оценку на:
-третьей международной конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, ВНИИФБиП с.-х. животных (6-8 сентября, 2000); -52-ой конференции молодых ученых и аспирантов «Молодые ученые животноводству», п. Дубровицы, ВИЖ (27 июня, 2003);
-научной конференции отдела кормления и приготовления кормов ВИЖа «Роль биологически активных веществ в кормлении сельскохозяйственных животных», посвященной 90-летию со дня рождения К.М. Солнцева, п. Дубровицы, ВИЖ (14 апреля, 2004).
По материалам диссертации опубликовано 4 работы. На защиту выносятся следующие основные положения:
- разработка лабораторного регламента по получению сухого пробиотика тококарина на основе токоферолсинтезирующего штамма №100;
-результаты изучения влияния пробиотика тококарина на популяцию микроорганизмов пищеварительного тракта, содержание в крови телят витамина А, каротина и токоферола;
- результаты изучения влияния пробиотика тококарина на естественную резистентность, интенсивность роста и профилактику заболеваний пищеварительного тракта телят.
Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 108 страницах компьютерного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы в количестве 155 источников, из них 30 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 13 таблицами, 32 рисунками.
7
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Микрофлора желудочно-кишечного тракта и ее значение для молодняка сельскохозяйственных животных
После рождения любой организм вступает во взаимодействия с окружающей средой и в первую очередь с микроорганизмами, которые могут проникать во все органы и ткани и заселяют желудочно-кишечный тракт, где они играют наиболее важную роль для организма.
Для профилактики здоровья организма важно поддерживать необходимое количество полезных бактерий в его пищеварительном тракте. Поэтому при выращивании молодняка необходимо создавать условия, обеспечивающие формирование собственного микробиоценоза. Основными факторами, влияющими на его формирование в желудочно-кишечном тракте животных, являются условия содержания, состав рациона (Виноградова A.M., Соловьев A.M., 1991; Тараканов Б.В., 2003), время приёма первой порции молозива, состояние иммунитета, проведение вакцинаций и применение лекарственных средств (Тимошко М. А., 1992).
По данным Tannock G.W. (1988) кишечная микрофлора, при ее стабилизации, является очень сложной и содержит около 1014 микроорганизмов, представляющих более 400 различных видов бактерий. В такой большой и сложной системе устанавливаются сложные взаимосвязи, как между микроорганизмами, так и между микро- и макроорганизмом. При этом кишечная микрофлора участвует в формировании устойчивости организма животного к желудочно-кишечным заболеваниям, благодаря таким свойствам как колонизационная резистентность, бактериальный антагонизм, барьерный эффект, бактериальное вмешательство, конкурентное исключение (Тараканов Б.В., 1999; Fuller R., 1989).
Значение микрофлоры ярко просматривается в опытах на гнотобиотиче-ских животных. Установлено, что безмикробные животные являются более чувствительными к заболеваниям, у них снижается активность ферментов, чем их близнецы с полной кишечной флорой (Караулов А.В., Душкин В.А, и
8
д.р.,1986). Например, безмикробные морские свинки могут быть убиты 10-ю клетками Salmonella enteritidis, а морскую свинку с нормальной микрофлорой - 109 клеток сальмонелл. Имеются данные о том, что устойчивость к заболеваниям у птицы может быть повышена путем дачи, вылупившимся цыплятам фекальной суспензии от взрослой птицы (Тараканов Б.В.,1999).
Несмотря на чрезвычайно важную роль микрофлоры пищеварительного тракта в жизнедеятельности макроорганизма, до настоящего времени нет единой ее классификации. Используя в качестве основы количественный критерий, некоторые авторы подразделяют микрофлору на главную, сопутствующую и остаточную (Пинегин Б.В., Коршунов В.М., Мерецков В.В., 1977). Принимая всю микрофлору, заселяющую желудочно-кишечный тракт, за 100% к главной относят около 90%. Она включает в основном бифидобакте-рии, лактобактерии и бактероиды, которые участвуют в метаболических процессах организма хозяина и играют важную роль. По мнению автора, сопутствующая микрофлора составляет около 10% и состоит из эшерихий, энтерококков и др. - так называемая условно-патогенная микрофлора, всегда присутствующая в пищеварительном тракте. Остаточная не превышает 1%. Сюда относят клебсиеллы, нитробактерии, протеи, дрожжи, клостридии, стафилококки, аэробные бациллы и др. - патогенная микрофлора, способная стать этиологическим фактором заболевания организма животных (Тараканов Б.В., 1999). Существуют и другие мнения по вопросу классификации (Аветисян Р.С., 1981; Чахава О.В., 1984; Копола де Бонилья, 1984; Балчюнайтис А., СтундженеА., 1986;DubosR., 1966).
Обычно имеется два различных типа бактериальных популяций, которые могут устанавливаться в пищеварительном тракте. Первой является та, которая существует в тесной связи с эпителием кишечника, а вторая встречается свободной в кишечном содержимом. Образующиеся в слизистой кишечника моносахара усваиваются сахаропротеолитическими бактериями (в т.ч. бифидобактериями), которые локализуются на слизистой и ферментируют углеводы до летучих жирных кислот. При этом побочные продукты метабо-
9
лизма утилизируются бактериями, функционирующими в просвете кишечника - метаногенными микроорганизмами (Дубинин А.В., Бабин В.Н., Раевский П.М., 1991).
Формирование микробиоценоза кишечника новорожденных телят завершается к 10-дневному возрасту, когда его качественные и количественные показатели сравнительно постоянны. В рубце телят микробная популяция становится стабильной с 6-9-недельного возраста, когда начинают функционировать преджелудки (Тимошко М.А., 1990). По литературным данным, в этот период у телят удавалось обнаружить представителей облигатной микрофлоры рубца взрослых животных, в частности Lactobacillus acidophilus, L. plantarum, L. casei. Streptococcus bovis, Str. faecium, Ruminococcus flavefaciens, R. albus, Clostridium cellobioparum, Cl. cellululolyticum, Bacteroides succinogenes, Aspergillus cellulose (Вракин В.Ф., Ковальчук И.С., 1968). Но уже в возрасте 2-4 недель у телят в рубце и сычуге выделено большое количество бактерий (Smith H.W., 1965).
По данным Зитаре И.К. (1983), пищеварительный тракт телят в условиях благополучного по желудочно-кишечным заболеваниям хозяйства в течение 12 часов после рождения свободен от микроорганизмов, а через 13-18 ч у 90,9% животных в 1г фекалий обнаруживается 106микробных клеток, у 81,8% исследованных телят этого возраста содержалось более 10 млн. эше-рихий. В фекалиях этих телят бифидобакгерии, стафилококки, протеи не обнаружены. Общая численность микроорганизмов у 82,2% телят в суточном возрасте достигала 1 млрд. микробных клеток в 1г.
В последующие 48-72 ч постнатального периода общее количество микроорганизмов в фекалиях телят достигало 2 млрд., а до 10-суточного возраста - 5-7 млрд. в 1 г. Выявлено, что у 5-суточных животных бифидобактерии высевались лишь в 60,6 % случаев (их уровень составлял в среднем 100 млн./г). У всех исследуемых телят, начиная с шести суток, обнаруживалось от 600 млн. до 2 млрд. бифидобактерии и от 6 млн. до 2 млрд. лактобацилл. Эшери-хии выявлены у всех телят этой группы, причем их количество стабилизиро-
10
валось на уровне 10-500 млн./г фекалий, стафилококки — у 72,7-90,9% телят, а их численность составляла 20-900 тыс/г. Протеи обнаружены лишь у 3% телят в 6-7-дневном возрасте в количестве 5 тыс..
Данные экспериментальных исследований других авторов в условиях хозяйств промышленного типа позволяют отметить, что желудочно-кишечный тракт подопытных телят суточного возраста достаточно интенсивно заселен микрофлорой. При этом состав микрофлоры у клинически здоровых и нормально развивающихся животных в течение всего опытного периода (21 день) значительно отличался от таковых у телят с признаками гастроэнтерита и отстававших в росте и развитии. В частности, у последних в однодневном возрасте микрофлора в кишечнике представлена в основном эше-рихиями, стрептококками, микрококками, протеями, бактероидами, клостри-диями. Такие облигатные микроорганизмы как бифидо- и молочнокислые бактерии, удалось выявить в содержимом кишечника лишь у 3-х и 7-дневных телят. Притом на протяжении всего периода наблюдений их количество значительно уступало таковому у клинически здоровых животных. К этому времени уровень бифидо-, и молочнокислых, целлюлозорасщепляющих бактерий и бактероидов у здоровых телят был выше соответственно на 52,83; 60,51; 41,09 и 23,56%. Вместе с тем показано, что численность эшерихий и стрептококков была ниже на 28,43 и 36,54% (Тимошко М.А., 1990).
Основными представителями микрофлоры пищеварительного тракта животных являются:
- Молочнокислые бактерии широко распространены в природе. Они встречаются в молоке, молочных продуктах, на поверхности растений и являются облигатными представителями микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека и животных. В морфологическом плане микроорганизмы представлены палочковидными и кокковидными формами микробных клеток и относятся к родам Lactobacillus, Streptococcus. Согласно определению Берги, род Lactobacillus включает 25 видов, из них 12 выявляются в пищеварительном тракте человека и животных. В частности, к таковым относятся: L.
11
delbrueckii, L.ieichmanii, L. lactis, L. bulgaricus, L. helveticus, L. acidophilus, L. salivarius, L. easel, L. plantarum, L. fermentum, L. cellobiosus, L. brevis, L. buchneri.
Несмотря на столь широкий диапазон встречаемости представителей группы молочнокислых бактерий в природе, в пищеварительном тракте приживаются лишь отдельные виды. Наиболее полная информация известна о таких видах, как L. acidophilus, L. salivarius, L.plantarum, L. fermentum, L. cellobiosus и S.bovis S. faecalis, S. faecium. Притом последние три вида в литературе больше представлены как энтерококки, а не молочнокислые бактерии (Тимошко М.А., 1973; Сорокин В.В., Тимошко М.А., Николаева А.В., 1973; Тимошко М.А., Холмецкая В.Г., Бурсук И.Ф., 1983; Фурдуй Ф.И. и др., 1987; Mitsuoka Т., 1969, а, Ь; 1982; Watkins B.A., Kratzer F.H., 1983).
Численность молочнокислых бактерий в кишечнике телят с признаками гастроэнтерита значительно уступает таковой у клинически здоровых, о чем говорилось выше. К 21-му дню после рождения у телят с признаками гастроэнтерита высевалось лишь 3,25% от количества бактерий этой группы у здоровых или 8,23 lg мк/г (Тимошко М.А., 1990).
С учетом высокой чувствительности этой группы бактерий к неблагоприятным воздействиям факторов окружающей среды на организм молодняка они были включены в перечень индикаторных тестов микробиологического статуса макроорганизма и особенно пищеварительного тракта.
Являясь составной частью нормальной микрофлоры пищеварительного тракта, молочнокислые бактерии присутствуют практически во всех его отделах, поддерживая состояние динамического равновесия в экологической системе макроорганизм — микроорганизм — внешняя среда (Тарабрина Н.П., 1980; Фурдуй Ф.И. и др., 1987; Mitsuoka Т., 1969).
Антибактериальная активность молочнокислых бактерий обусловлена их способностью, образовывать в процессе брожения молочную кислоту, а также продуцировать лизоцим и антибиотические вещества - лектолин, низин, лактоцидин, ацидофилин. Пониженная иммуногенность этой группы
12
микроорганизмов для кишечника и организма в целом имеет определенный биологический смысл, так как, обладая слабо выраженными антигенными свойствами, они могут вступать в тесный контакт со слизистой оболочкой кишечника и предохранить ее от возможного внедрения патогенных микробов.
- Одними из основных представителей молочнокислых бактерий являются бифидобактерии. Типичными продуктами метаболизма бифидобакте-рий, образующимися в процессе их жизнедеятельности, являются молочная, уксусная, муравьиная и янтарная кислоты. Образование кислых продуктов приводит к снижению рН среды до 4,0—3,8, а последнее - к торможению роста и размножения гнилостных, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, чувствительных к кислой реакции среды в желудочно-кишечном тракте.
Полезное действие на макроорганизм со стороны бифидобактерии отмечено также благодаря их способности, синтезировать аминокислоты и белки, витамины (тиамин, рибофлавин, пантотеновую кислоту, пиридоксин, циан-кобаламин, фолиевую и никотиновую кислоты, витамин К), которые всасываются в кишечнике и используются макроорганизмом в метаболических процессах (Куваева И.Б., 1976; Слабицкий Я.И., 1982).
Наиболее существенную роль в синтезе и всасывании витаминов в пищеварительном тракте выполняют бифидобактерии рубца крупного рогатого скота, которые способствуют поддержанию на оптимальном уровне процесса нормального кроветворения за счёт синтеза цианкобаламина в присутствии солей кобальта, поступающих в рубец с кормом (Палфий Ф.Ю. и др., 1986). Бифидобактерии обладают еще одним очень важным свойством, а именно способностью в значительной мере снижать степень канцерогенеза у животных, вызванного представителями кишечной микрофлоры (Mizutani Т., MitsuokaT., 1981).
О важности молочнокислых бактерий в жизнедеятельности организма животных нет сомнений. Доказано, что обогащение пищеварительного трак-
13
та лишь одним видом - ацидофильной палочкой - способствует активизации секреторной деятельности желез желудка и кишечника, усилению перистальтики и ферментативной функции (Сизова А.В., 1974; Платонов А.В., 1985).
С учетом важной роли молочнокислых бактерий в жизнедеятельности макроорганизма, дальнейшая работа с этой группой микроорганизмов была направлена на селекцию и отбор штаммов, обладающих высоким лечебно-профилактическим потенциалом при желудочно-кишечных заболеваниях, в том числе дисбактериозах.
- Бактероиды относятся к одной из многочисленных групп микроорганизмов населяющих пищеварительный тракт молодняка сельскохозяйственных животных. Это неспорообразующие грамотрицательные палочковидные
оС формы микроорганизмов, включенные в семейство Bacteriedaceae и род
Bacteroides, в последний входят 22 вида, обитающие в полостях организма человека и животных. У здоровых телят выделяют вид B.ruminicola var. ruminicola, а у больных гастроэнтеритом B.fragilis и в меньшем количестве B.raminicola var. ruminicola. Некоторые виды могут быть патогенными в определенных условиях.
oi Сведения о встречаемости микроорганизмов семейства Bacteriedaceae у
телят и поросят весьма ограничены и касаются в основном животных с диа-рейным синдромом (Binder А., 1982; Myers L.L., Snoop D.S., Firehammer B.D. etal., 1985).
Среди сельскохозяйственных животных (Smith H.W, 1965) бактероиды выделены из содержимого желудка крупного рогатого скота и кроликов (8,0 и 4,2 lg мк/г), толстого отдела кишечника у овец, свиней и кроликов (4,2; 7,4 и 8,5 lg мк/г); среди лабораторных животных у мышей (9,4 lg мк/г), крыс (8,2 lg мк/г) и морских свинок (7,8 lg мк/г). Эти микроорганизмы встречаются также у кур и уток порядка 8,7 lg мк/г содержимого толстого кишечника.
-Установлено, что клостридии также являются представителями микрофлоры желудочно-кишечного тракта цыплят, поросят и телят (Сизова А.В., 1974; Smith H. М., 1965).
14
Обнаружено, что клостридии высеваются из проб содержимого кишечника поросят и телят с признаками гастроэнтерита или слаборезистентных, у которых регистрируется дисбактериоз, т. е. нарушение соотношения между облигатными и транзидентными представителями кишечной микрофлоры. От здоровых поросят с оптимальным составом микрофлоры пищеварительного тракта выделить клостридии, как правило, не удаётся.
Облигатная микрофлора выполняет защитную функцию при заселении пищеварительного тракта клостридиями, особенно молочнокислые и бифи-добактерии. Об этом свидетельствует тот факт, что в результате целенаправленного введения заквасок этих бактерий телятам сразу после их рождения и до приема первой порции молозива была обеспечена барьерная функция в отношении Cl. perfrmgens, животные до 30 дней были здоровыми. Имеющаяся информация позволяет отнести клостридии к представителям внутрихозяйственной инфекции (Тимошко М.А., 1990).
- Группа энтерококков является облигатной для желудочно-кишечного тракта человека и животных и относится к семейству Streptococcaceae и роду Streptococcus. К настоящему времени идентифицированы стрептококки 21 вида, однако энтерококки, то есть стрептококки, населяющие пищеварительный тракт человека и животных, представлены следующими видами: Str. faecalis, Str. faecium, Str. durans, Str.equinis, Str. bovis, Str. glycerinaceus, Str. liquefaciens, Str. zymogenes, Str. gallinarum.
Наиболее полная информация о классификации энтерококков и их положении в семействе Streptococceae дана в работах В.И. Седова, О.М. Шумило (1983), W. Ludwig, E. Seewaldt, R.K. Balz et al. (1985), K.H. Schleifer (1986).
Доказано, что антибактериальная активность энтерококков обусловлена их способностью, продуцировать молочную кислоту. При высокой скорости роста энтерококков образуется лактат, а при низкой появляются муравьиная и уксусная кислоты. Конечными продуктами метаболизма этой группы микроорганизмов являются лактат, ацетат, этанол, формиат, ацетоин, диацетил,
15
глицерин и 2,3-бутандиол. Антагонизм энтерококков наиболее сильно проявляется по отношению к эшерихиям, сальмонеллам, протеям, микрококкам, стафилококкам, псевдомонадам. В сравнительном аспекте антагонистическая активность Str. faecalis оказалась значительно выше активности Str. faecium.
Некоторыми авторами эта группа микроорганизмов относится к условно-патогенной микрофлоре. Патогенность связывают в основном с наличием у них гемолитических, протеолитических свойств, плазмокоагулазной, фиб-ринолитической, гиалуронидазной активности. Однако среди энтерококков имеются виды, обладающие весьма полезными свойствами - антибактериальной активностью к возбудителям кишечных заболеваний. Так, на основе чистой культуры Streptococcus faecium М-74 приготовлен сухой микробный препарат (лактиферм) и испытанный на телятах молочного периода с положительным действием на рост и сохранность (Svosil В., Danek 3., Kumprecht I.,ZobacP.,1987).
- Несмотря на то, что по количественному составу облигатно-анаэробная микрофлора в пищеварительном тракте человека и животных доминирует, нельзя недооценивать значение для макроорганизма группы кишечной палочки или эшерихий. Они относятся к семейству Enterobacteriaceae и являются типичными условно-патогенными микроорганизмами (Sziegoleit, 1987).
Существуют определенные условия, при которых патогенные свойства эшерихий проявляются: при доминировании их численности над другими представителями облигатной микрофлоры; при снижении общей резистент-ности макроорганизма; при наличии условий, способствующих выделению энтеротоксинов (Тимошко М.А., Холмецкая В.Г., Бурсук И.Ф., 1983; Гушун В.А., Афанасьев Л.А., 1984; Бортничук В.А., Степанюк О.В., 1986; Кочеров-ский Ю.Э. и др., 1986; Фурдуй Ф.И. и др., 1987). Следует отметить, что наличие эшерихий в нижних отделах желудочно-кишечного тракта (слепая и прямая кишки) в небольших количествах не вызывает развития патологических процессов, так как они локализуются исключительно в просвете.
16
Как и другие микроорганизмы остаточной части нормальной микрофлоры, эшерихии вызывают постоянное антигенное раздражение системы местного иммунитета, поддерживая ее в физиологически активном состоянии. Активация сопровождается секрецией иммуноглобулинов. Кроме того, эти микроорганизмы могут обладать перекрестными антигенными свойствами, что способствует синтезу иммуноглобулинов, специфически взаимодействующих с определенными патогенными бактериями. Присутствие в кишечнике секреторных иммуноглобулинов препятствует проникновению в слизистую оболочку патогенных представителей семейства энтеробактерий.
Несмотря на то, что эшерихии признаны неотъемлемой частью нормальной микрофлоры кишечника человека и животных, их удельный вес в возникновении кишечных заболеваний остается весьма высоким. У молодняка всех видов животных наиболее часто встречаются заболевания желудочно-кишечного тракта, которые являются причиной падежа в 95 % в первый месяц жизни телят (Сафонов Г. А. и др., 1992; Шубин А.А. и др., 1994).
1.2. Роль микрофлоры желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных и птицы в обеспечении их каротином, витаминами А и Е
Микрофлора пищеварительного тракта выполняет многие функции в организме животного и участвует в образовании ряда биологически активных веществ, а иногда является единственным источником биосинтеза некоторых метаболитов, например целлюлазы. В литературе имеется достаточно много данных о синтезе витаминов микроорганизмами рубца, таких как тиамин , рибофлавин, пиридоксин, никотиновая, пантотеновая и фолиевая кислоты, цианкобаломин, витамин К (Жеребцов П., Вракин В., Ходырев А., 1970; Светликовская И. А., 1967; Сизова А.В, 1974).
Установлено, что микрофлора желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных способна синтезировать каротины и токоферолы. Так, при исследованиях нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта животных были выделены каротинсинтезирующие микроорганизмы из рубца, тонкой, толстой, слепой и прямой кишок овец и
17
из рубца, тонкой, толстой, слепой и прямой кишок овец и крупного рогатого скота. Было выделено 190 штаммов микроорганизмов, образующих желтые пигменты, 126 из которых показали каротинсинтезирующую способность. Эти штаммы синтезировали 0,9-8,6 мкг каротинов на 100 мл питательной среды. Была проведена идентификация 108 каротинсинтезируюпщх культур, из которых 62% отнесены к семейству Bacteriaceae рода Flavobacterium и группе неидентифицированных микроорганизмов, а 38% - к семейству Сос-сосеае, из которых 28,8% оказались представителями рода Streptococcus и остальные - рода Micrococcus (Лаврентьева Л.И., 1970; Могильниченко Н.В., 1972; Пивняк И.Г., Арифджанова М.К., 1977; Пивняк И.Г., Тараканов Б.В., 1982).
В результате изучения микрофлоры рубца крупного рогатого скота впервые выделены токоферолсинтезирующие микроорганизмы, которые в условиях in vitro образовывали до 32 мкг а-токоферола на 100 мл питательной среды. Выявлена прямая корреляция между синтезом бактериями каро-тиноидов и а-токоферола, т.е., если данная культура синтезирует каротины, то у неё может идти и синтез а-токоферола Кроме того, установлен факт существования токоферолсинтезирующей микрофлоры в желудочно-кишечном такте цыплят. (Худяева Е.Н., 1990, 1991; Пивняк И.Г., Худяева Е.Н., Попов А.Н., 1994).
В опытах по использованию аминокислот для регулирования микробиологических процессов в рубце жвачных животных установлено что, включение в рацион жвачных метионина повышает синтез витаминов Е, РР и группы В микрофлорой рубца (Тараканов Б.В., 2003). Есть информация о способности молочнокислых бактерий, входящих в состав пробиотиков энтероби-фидина и бактрила синтезировать наряду с витаминами В, С и К, витамин Е (Карпуть И.М., Бабина М.П., 1998).
В связи с тем, что Э-каротин выполняет множество функций в организме как животных, так и человека, его мировое потребление увеличивается быстрыми темпами и к 2000 году достигло уровня 715 т в год. Рост потребления других каротиноидов составляет до 13% в год (Алексеева Л.Ф., |
